Artemisia artemisinină, extracție, malarie CUPRINS ÎN EXTRACELE ARTEMISIE ANUA L OBȚINUTE DE DIFERITE METODE

CUPRINSUL ARTEMIZININULUI ÎN EXTRACUL ARTEMISIEI ANNUA L OBȚINUT DE DIFERITE METODE Soktoeva, G.L. Ryzhov, K.A. Dychko, V.V. Khasanov, SV Zhshzhitzhapova, LD Padnaeed Universitatea de Stat din Buryat, st. Smolin, 24a, Ulan-Ude (Rusia) Universitatea de Stat Tomsk, 36, Lenina Ave., Tomsk (Rusia) Institutul Baikal pentru Managementul Naturii, Filiala Siberiană a Academiei de Științe din Rusia, ul. Sakhyanova, 8, Ulan-Ude (Rusia)

Sunt luate în considerare întrebările privind izolarea artemisininei din Artemisia annua L. și determinarea cantitativă a acesteia utilizând metoda HPLC-MS. Artemisinina a fost izolată prin diferite metode de extracție: macerare, ultrasunete și extracție subcritică de CO2. Componența componentelor de extracte de CO2 și hexano a fost studiată prin GC-MS.

introducere

Artemisinina (1) este un sesquiterpen peroxid [1], care este un medicament antimalaric foarte eficient și un precursor al compușilor mai puternici, cum ar fi artemether, artesunat și alții. Importanța artemisininei și a derivaților săi se bazează pe acțiunea foarte rapidă a unui compus de acest tip împotriva patogenului său principal Plazmodium falciparum, care provoacă, de asemenea, afecțiuni ale creierului. Sinteza chimică și biochimică a artemisininei sa dovedit a fi foarte costisitoare și, prin urmare, în prezent neviabilă ca sursă principală de producere a artemisininei [2].

Malaria este cauzată de un microorganism - malariei Plasmodium. Există 4 tipuri de astfel de plasmodium, parazitici în corpul uman: Plazmodium vivax, P. ovale, P. malariae și P. falciparum. La mijlocul secolului XX, datorită utilizării pe scară largă a chininei și a derivaților săi, a fost posibilă reducerea semnificativă a numărului de pacienți cu malarie. Cu toate acestea, din anii '60. secolul trecut, malaria a reamintit din nou. Acest lucru sa datorat faptului că în Thailanda și America de Sud malaria Plasmodium (P. falciparum), rezistentă la chinină, clorochină, meflochină și alte medicamente pe bază de chinolină, a apărut și sa răspândit în alte regiuni [3, 4]. Problema găsirii unor noi medicamente antimalarice eficiente, printre care a fost propus artemisinin, a devenit actuală. Acest compus unic a fost descoperit în China (numele chinezesc este qinghaosu). Lucrările au început în 1967 și au fost numite "Programul 523" [5]. Este izolat de pelinul anual Atemisia annua L., distribuit pe teritoriul fostei URSS, care acoperă zonele Altai, Transbaikalia, Amur, Kazahstan, Kârgâzstan, Uzbekistan și Turkmenistan. Pelinul este reprezentat pe scară largă în China și în alte țări [6]. Cantitatea totală de artemisinină izolată din diferite părți ale A. annua este de aproximativ 0,01 și 1,4% din masa frunzelor uscate [2].

Artemisia annua L. este principala materie primă pentru producția de artemisinină. Organizația Mondială a Sănătății, în 2001, a recomandat utilizarea artemisininei în terapia de primă linie pentru controlul malariei, ceea ce a dus la o creștere a suprafeței sub pelin de un an. In mare parte, pelinul este cultivat anual in Asia de Est, in principal in China si Vietnam (70% din suprafata din stocul mondial), introdusa recent in cultura din Africa de Est si de Sud (20% din suprafata lumii) [7].
În plus față de artemisinin, A. annua este evaluat pentru uleiul său esențial, care are o aromă dulce și ierbă caracteristică și se folosește în parfumerie și produse cosmetice. În plus, uleiul are proprietăți antibacteriene și poate fi utilizat pentru tratarea bolilor de piele. În plus față de lactonele sesquiterpenice, care au valoarea terapeutică principală, uleiurile esențiale ale acestei plante conțin o cantitate semnificativă de componente care au valoare, cum ar fi 1,8-cineoleum, alcool artemisia și cetonă, borneol și altele. a analizat, de asemenea, efectul fiziologic al extractelor lipofile pe piele [2].
În legătură cu compoziția bogată și diversă a substanțelor biologic active conținute în Artemisia annua, este de mare interes găsirea de noi zone de creștere a pelinului anual. În Republica Buryatia cresc 46 de specii de polinum [8], inclusiv Artemisia annua L. Conținutul de artemisinin din Polonia, de un an, în creștere în Buryatia, nu a fost studiat anterior. Prin urmare, scopul acestei lucrări a fost determinarea cantitativă a artemisininei în extractele obținute prin diferite metode de extracție.

Partea experimentală

Materia primă pentru studiu a fost selectată în partea de sus a solului Artemisia annua L., colectată în prima decadă a lunii august 2010, în faza de înflorire.
Izolarea artemisininei și a altor substanțe biologic active (ulei esențial) a fost efectuată prin diferite metode de extracție: macerare, extracție cu ultrasunete și extracție subcritică de CO2. Extracția a fost efectuată pe instalații de laborator. Se utilizează hexan, acetat de etil, etanol și CO2 ca extractanți. Datele și parametrii de extracție sunt arătați în Tabelul 1. Extractele din precipitat au fost separate prin centrifugare într-o centrifugă OP-8UHL4.2 la 5000 rpm și apoi filtrate printr-un sistem de filtrare a probelor.
Cantitatea de artemisinină a fost determinată prin HPLC-MS utilizând un cromatograf lichid de înaltă performanță Finnigan Surveyor echipat cu un autosampler autosampler Plus și o pompă LC Pump Plus cu un detector Finnigan LCn Advantage MAX, metoda ionizării - electrospray. Coloana "Hypersyl Gold" 150 × 4 mm, umplută cu sorbent de silicagel cu faze grefate C18 (dimensiune a particulelor 5 pm), (fabricat de Thermo electronic corporation, USA). Eliminarea a fost efectuată în mod izocratic (50% (A): 50% (B)), compoziția tamponului inițial (A) a fost o soluție apoasă de acid formic (pH = 3) + 2 ml soluție saturată de acetat de amoniu, 100% acetonitril. Debitul volumetric al eluentului este de 0,5 ml / min, volumul probei injectate (autosampler) este de 25 μl. Înregistrarea ionului a fost efectuată în modul de monitorizare a ionilor încărcați pozitiv (Monitorizarea selectivă a ionilor, SIM), cu o masă moleculară de 300 (datorită adăugării ionului de amoniu NH4 la molecula artemisininei) cu o lățime a ferestrei (299-301) m / z. S-a efectuat determinarea cantitativă utilizând metoda standard intern folosind proba standard de stat de la Sigma.

Metode și parametri de extracție

Nr. P / p Metoda de extracție Extractant Timp de extracție / parametri de extracție Conținutul de artemisinină în%, în termeni de a.s.s.
1 Macerarea etanolului 24 h / raportul materiilor prime: solvent (1: 5) 0,040 ± 0,002
2 etanol macerare 48 ore / raportul materiilor prime: solvent (1: 5) 0,038 ± 0,002
3 Macerarea hexanului 24 h / raportul probei: solvent (1: 5) 0,039 ± 0,002
4 etanol de extracție cu ultrasunete 15 min / raport de materii prime: solvent (1: 5), frecvență sondă 50 Hz, T = 25 ° C 0,039 ± 0,002
5 Extracție cu ultrasunete acetat de etil 15 min / raportul materiilor prime: solvent (1: 5), frecvența sondării 50 Hz, T = 25 ° C 0,022 ± 0,001
6 Extracție cu CO2 so2 24 ore / debit 30 l / h, T = 20-22 ° C, P = 6,0-6,2 MPa 0,054 ± 0,003

În plus, componentele volatile ale extractelor de CO2 și hexan au fost investigate prin cromatografie-spectrometrie de masă pe un cromatograf de gaze Agilent Packard HP 6890 cu un detector quadrupole MSD 5973N. Am folosit o coloană cu cuarț de 30 metri TR-5 ms cu un diametru interior de d = 0,25 mm, o grosime a filmului de 0,25 μm. Separarea cromatografică a fost efectuată așa cum este descris în [9]. Componentele extractelor au fost determinate calitativ prin compararea spectrelor totale de masă cu datele unui cromatograf de date cu spectrometrie de masă a substanțelor volatile de origine vegetală A. Tkachev, bibliotecile NIST 08 și Wiley 275. Rezultatele analizei sunt prezentate în tabelul 2.

Principalele componente ale extractelor de CO2 și hexan
Suprafața de vârf relativă Conexiuni Suprafață vârf relativă
Compuși ai extractului de hexan din extractul de CO2
Extract de CO2 Extract de hexan
Monoterpenoide hidrocarburi cu catenă lungă
Tricicilen 140181 - Tricosan 103969 52288
a-pinene 1155320 - Tricozen-1 1956324 -
Camphene 2021028 - n-Pentacosane 534763 110485
R-pin 371548 1683858 645634 - - -
n-heptacozan 279800 132358
3-carenă

Hidrocarburi ciclice
limonen
Pentacyclo 576196 -
R-phellandren 587143 - [7,5,0,0 (2,8).0 (5,14) 0.
1,8-cineol 133599 - (7,11)] tetradecan
Artemisia cetonă 1413437 - 1,8-dimetilfenantren 3765681 1080289
Borneol 170158 707945 - - Flyuoren 3507465 319501
Bornit de acetat

diterpenoizi
sesquiterpenoide
3,5-bis (etilamino) benzoat de metil 627581 283913
Cariofillen 370714 214560 - -

Karyofilen oxid
Germacren D 214913 -
R-Selinene 3053333 328535
a-cadinol 149485 -

Discutarea rezultatelor

După cum se poate observa din datele prezentate în tabelul 1, randamentul cel mai scăzut al artemisininei a fost (0,022%) cu extracție ultrasonică cu acetat de etil. Conținutul de artemisinin în extractele izolate prin extracție și macerare cu ultrasunete folosind diferiți solvenți (hexan, alcool etilic) nu este semnificativ diferit 0,038-0,040% în termenii A. p. Când se insistă anual la pelinul de alcool etilic timp de 24 și 48 de ore, conținutul de artemisinin din extractele obținute este aproximativ același cu 0,040 și respectiv 0,038%. Cel mai mare randament al artemisininei (0,054%) a fost obținut în timpul extracției pre-critice de CO2. Pentru comparație, prezentăm câteva date privind conținutul de artemisinin, în pelin de un an, care crește în diferite teritorii. Artemisia annua L., care crește în diferite părți ale Chinei, conține de la 0,01 până la 0,22% artemisinină. Unele hibrizi de pelin anual cultivat în China și Vietnam conțin de la 1,0% până la 1,5% artemisinină [10]. Conținutul artemisininei din A. annua, care crește pe teritoriul fostei URSS, este după cum urmează (valorile sunt date în materie de materii prime uscate la aer): SSR georgian (0,005%), SSR kârgâz (0,025%), SSR moldovenească (0,01-0,02%, Teritoriul Krasnodar (0,04%), SSR ucrainean (0,005-0,05%), Turkmenistan (0,05% în țările arabe), Kazahstan (0,01-0,05% în termeni de A.S.S.) [11].
In studiul compoziției extractelor de Artemisia annua derivate de extracție a CO2 și macerare când este utilizat ca hexanul extractant prin gaz cromatografie-spectrometrie de masă găsit diferențe semnificative în compoziția extractelor. Metoda hromatomassspektrometrii detectată monoterpenoide, sesquiterpenoide, hidrocarburi cu catenă lungă, hidrocarburi ciclice și diterpenoizi.
Monoterpenoidele se găsesc numai în extractul de CO2. Componentele majore ale extractului CO2 sunt pinen, 3-carenă, artemisia cetonă, (3-Celine tricosene-1, 1,8-dimetilfenantren și fluoren.

Extract de hexan Artemisia annua prin gaz-spectrometria masăcromatografie identificat în principal lung hidrocarburi cu lanț și hidrocarburi ciclice a fost detectată de la sesquiterpenoide 3 Selin.
În plus față de artemisinin, care este de valoare medicinală primară, uleiul esențial conține un număr mare de componente de valoare biologică, cum ar fi artemisia cetonă, 1,8-cineol, borneol etc.

constatări

1. Conținutul de artemisinin în diferite extracte de A. annua (parte aeriană, fază de înflorire) care crește pe teritoriul Republicii Buryatia a fost determinat prin HPLC-MS.
2. Conținutul maxim de artemisinină se găsește în extractul de CO2 (0,054% în termeni de a.s.c.)
3. Cu ajutorul spectrometriei de masă de cromatografie, s-a studiat compoziția uleiului esențial extras prin diferite metode de extracție.

Artemisia annua L.
Descrierea descrierii

Numele rusesc

taxonomie

imagine

Plantele pe hartă

Descriere botanică

Artemisia annua L. Sp. pl. (1753) 847; Bess. în Nouv. Mem. Soc. Nat. Mosc. III, 81; Dc. Prodr. VI, 119; LDB. Fl. Ross. II, 592; Boiss. Fl. sau. III, 371; Maxim. în Bull. Acad. Sc. Petersb. Viii, 528; Hook. Fl. Br. Ind. III, 323; Com. in fl. Manchu. III, 659; Nakai, Fl. Coreeană. II, 30; Fedch. Adyge. sol. Turk. IV, 200; Rydb. North Am. Fl. 34, partea 3, 259; Pampan. în Nuov. Giorn. Bot. Ital. f.s. XXXIV, 637; Sala și Clem. Artem (1923) 102; Com. și alice. Res. sol. Orientul Îndepărtat kr. II, 1036; Krasheniny. in fl. sud-est. Europ. Partea URSS, VI, 357; Grossg. Fl. Kavko. IV, 138; Krasheniny. și Wings. Fl. Zap. Sib. XI, 2816; Polyak. în Mayevsky, FL. 586. - A. chamomila Winkl. în Tr. Universitatea din Petersburg. bot. Grădină, X, 87; Fedch. op. Op. - Am. Stirp..rar. T. 193, f. 23; Gmel. Fl. sib. Fila II. 25. - Ex.: ГРФ № 3152. - Pelin de un an.

Anual. plantă parfumată, verde, gol sau dispersate,, firele de păr mici din jur, drepte, cu nervuri, sau maroniu-violet maroniu tulpină de 30-100 cm.; frunzele sunt punctate-fossa-ferruginous, petiolate inferioare, 3-5 cm lungime.. Și 2-4 cm lățime, ovale, trei peristorassechonnye, cuisoare ultima comanda prodolgovatolantsetnye, korotkozaostronnye; întreg sau cu 1-2 dinți, 1-2 mm lungime. și lățime de 0,5 mm; medie și tulpina frunze de două ori peristorasschonnye, sesile superioare, mai mici și mai puțin complexe, bracteele superioare simple sau cu un număr mic de lobi laterali. Coșuri sferice, 2-2,5 mm., Respinse sau bleg Numeroase, pe picioare scurte, connivent pe ramuri scurte, în b. m. inflorescență piramidală lungă, panică; wrapper neted frunzele exterioare alungit liniar, verde, oval intern sau aproape rotund de-a lungul marginii larg plonchato mărginită lucios; recipientul bulging, gol; Pistilurile margine, inclusiv 10-20, filiform corolă dot glandulare, lame stigmate îngust liniare, obtuz, afișare a unui tub; florile de disc sunt bisexuali, 12-30 în număr, tubulare înguste, goale; anterele limitate, linia superioară, alungite superioare, lobii bazali, foarte scurți, arșiți; coloană scurtă decât stamine, stigma lobi liniare, drepte, ușor Respins, deasupra ciliata; achene 0.8-0.6 mm., alungite, ovoidale, plat, în partea superioară, cu o zonă circulară mică, mărginite de margine cu greu. Col. VIII - IX.

În locuri de buruieni în apropierea locuințelor, grădinilor, grădinilor. - Europa. h:... Verh.-Nistru Verh Dnepr, Volzh Don, Zavolzhie Don Lower, Prichern, Bess, Crimeea.......; Caucaz: Zap.- și Est. Trans., Tal., Miercuri Asia; Aral-Caspian, Pribalh, Dzh.-Tarbes, Tien-Shan, The Syr-Dar, Pam.-Al. Amu-Dar, Horn....... Turkmen. Tot. var: miercuri Evr., Srediz., Balk.-Maloaz., Arm.-kurd., Iran, Dzh.-Kashg., Balenă., Yap., Mongolia, Nord. America (străin).

Tipul de vedere este desenele lui Amman și Gmelin.

Gospodării. VAL. Randamentul uleiului esențial este de 0,1-0,64% (conform lui Goryaev). Potrivit lui Joshikazu Imade (1937), cineolul și substanța C10H60 sunt în ulei; această substanță a fost studiată în detaliu de Ashania și Joshitomi (1917); împreună cu artemacyaketonul, izomerul său, isoartemisieacetonă, a fost găsit în ulei. Această cetonă a fost capabilă să se izoleze din lichidul mamă care rămâne în prepararea semicarbosonului artemacyacetonic. Seisi Takagi (1928), în timp ce continuă să studieze japoneză A. annua, cunoscute ulei 4 componente adăugate încă 2 nou: cadinene și caryophyllene. Pe baza studiilor Rutovskogo și Vinogradov (1929), ulei compus din α-pinen, cineol, camfen și izoartemiziaketona artemiziaketona, o mică cantitate de borneol, acetic și acid butiric, kimunovogo aldehida (probabil semikarbozon) și fenol (probabil eugenol). Piesele subterane ale unei cantități mici de alcaloizi găsit (Lazurevsky, Sadykov 1939; Massagetae, 1947). Conform observațiilor din domeniu (Yunatov, 1954), în stare verde nu este mâncat de animale. Prezența alcaloizilor este confirmată de M.I. Goryaeva, G.K. Kruglykhina, E.I. Satdarova (1959).

Rezumat și disertație privind medicina (04/14/02) pe tema: Studiul farmacognostic al Artemisia annua L. și Artemisia sieversiana Willd. flora din Buryatia

Rezumatul disertației în medicină pe tema Studiul farmacognostic al Artemisia annua L. și Artemisia sieversiana Willd. flora din Buryatia

Ca un manuscris

Soktoeva Tuyana Erdemovna

ARTEMISIA CERCETĂRII FARMACOLOGICE ANNUA L. ȘI ARTEMISIA SIEVERSIANA WILLD. FLORI DE BURAȚIE

04/14/02 - chimie farmaceutică, farmacognostică

Rezumatul disertației pentru gradul de candidat al științelor farmaceutice

Teza se face în „Buryat Universitatea de Stat“ VPO al Ministerului Educației și Științei al Federației Ruse și Academia Rusă de Științe Institutul de Baikal Naturii Management, Filiala siberian al Academiei Ruse de Științe

Supervizor: Doctor în Științe Chimice, Profesor

Radnaeva Larisa Dorzhievna

Oficialii adversari: Doctor în Științe Biologice, profesor universitar

Antsupova Tatyana Petrovna

Candidatul de Științe farmaceutice Mongolov Hanhai Purbuevich

Organizația principală: statul Perm

Ministerele Sănătății și Dezvoltării Sociale ale Federației Ruse

Protecția va avea loc „23“, în decembrie 2011 la 10 °° ore la o reuniune a Consiliului DM Dissertation 003.028.02 la Institutul de Biologie Experimentala Generale si SB RAS la: 670047, Ulan-Ude, ul.Sahyanovoy 6.

Disertația este disponibilă la Biblioteca Științifică Centrală a Centrului Științific Buryat al SB RAS.

Rezumatul a fost publicat pe 22 noiembrie 2011.

Secretar științific al candidatului la Consiliul de Disertație al științelor biologice

DESCRIEREA GENERALĂ A LUCRĂRII Relevanța subiectului. Plante Artemisia genul (Artemisia) -perspektivnye surse de substanțe biologic active, specii precum tarhon Artemisia dracunculus L., pelinul Artemisia absinthium L., Artemisia vulgaris Artemisia vulgaris L. utilizate pe scară largă în medicină și alimentare industriile tradiționale, holistică. Peliniță Peliniță L. a fost introdus cu succes în cultura în multe țări, iar în 2001 a fost propus de OMS ca sursă principală de artemisinin - prima linie de agent de tratament pentru malarie. Astăzi, țările producătoare de artemisinin asigură aproximativ un sfert din nevoile globale de sănătate (Tolstikova, 2010; Xiao Wang, 2011). Din n. 137 anual alocat compuși biologic activi, incluzând 40 sesquiterpene, 10 terpene 7 cumarine, flavonoide 46 care pot servi ca bază pentru dezvoltarea de droguri (Bhakuni, 2001). În 80-e ai secolului XX, un grup de oameni de știință (Schroeter, 1989) au făcut încercări de a culturii n sălbatice. Florei anuale VILR URSS (Moscova). În zilele noastre, lucrările majore privind introducerea elementului de primă ani se desfășoară la Universitatea de Stat Tomsk. În Buryatia n. Anul este o specie de creștere sălbatică.

Împreună cu n. Buryatia.Centrarea anual pe scară largă Sievers pelinul Artemisia sieversiana Willd., Care este, de asemenea, promițătoare pentru vizualizare de sănătate.. În iarbă, n Sievers conține flavonoide, ulei esențial, cumarina (Tkachev 2002, Shatar, 1998; Hanina 1999; Suleimenov, 2009).. Ulei esențial din revendicarea Sievers este de interes ca o sursă de chamazulene - un compus non-toxic care are un antiinflamator, antibacterian, regeneratoare (Berezovskaja, 1991; Hanin, 1992).

Până în prezent, un studiu chimic detaliat al pelinului pelin și pelinului din pelicula anuală de la Buryatia nu a fost efectuat ca surse promițătoare de substanțe biologic active, prin urmare, studiul lor este o sarcină urgentă.

Obiectiv: Studiul farmacognostic al pelinului Sivers Artemisia sieversiana Willd. și pelinul anual Artemisia annua L. ca surse valoroase de substanțe biologic active.

Pentru a atinge acest obiectiv este necesar să se rezolve următoarele sarcini:

1. Identificarea semnelor anatomice și diagnostice ale părții aeriene a lui Sivers și a lui P. de un an pentru a stabili indicatorii de merchandising

materii prime, evaluarea rezervelor și posibilitatea de recoltare p. un an și p. Siversa pe teritoriul Republicii Buryatia;

2. Pentru a studia compoziția chimică din principalele grupe de substanțe biologic active ale plantelor menționate anterior și de a determina conținutul cantitativ, pentru a stabili localizarea artemisinin și uleiuri esențiale în părți separate ale plantelor, pentru a studia dinamica fazelor lor de dezvoltare de acumulare și stabilirea condițiilor optime de colectare;

3. Să dezvolte o metodă pentru determinarea cantitativă a artemisininei în partea aeriană a vârstei de un an;

4. Determinarea indicatorilor și standardelor de calitate pentru conținutul de substanțe biologic active de bază, elaborarea documentației de reglementare pentru materiile prime medicinale - iarba pelinului Sivers și iarba pelinului de un an.

Noutatea științifică. Au fost stabilite principalele caracteristici de diagnostic ale ierbii Sivers și P. anual, au fost elaborați indicatorii numerici necesari pentru standardizarea materiilor prime.

Sa studiat compoziția chimică a ierbii de la Sivers și a ierbii de un an. Conținutul de uleiuri esențiale, flavonoide, acizi grași, macro și microelemente a fost determinat. Flavonoidele - luteolin-7-glucozidul, rutina, quercetinul și chryoeriolul au fost detectate prin metoda HPLC-MS în aceste plante. Principalii acizi grași din tipurile de pelin studiate sunt palmitic, linoleic, linolenic, acidul octadecenic 10% se găsește și în pelinul semnificativ.

S-au determinat condițiile de extracție a artemisininei (tipul de extractant, metoda de extracție, timpul de extracție) din planta anuală și sa stabilit că extracția maximă a artemisininei se realizează prin extracție cu ultrasunete și subcritice de CO2. Prin HPLC-MS sa stabilit că cea mai mare cantitate de artemisinină din vârsta de un an este conținută în faza de înflorire a inflorescențelor.

Studia dinamica acumulării de ulei esențial, în funcție de faza de dezvoltare și de o parte a plantei. Cea mai mare cantitate de ulei esential de Chamazulene p. Siversa se acumuleaza in fazele de inmugurire si inflorire in inflorescențe.

Indicatorii de calitate stabiliți de BAS sunt incluși în documentele de reglementare.

Semnificația practică. Rezervele și volumul anual posibil de achiziționare a unei localități Sivers și o decontare de un an pe teritoriul Republicii Buryatia (decontare a Sivers - de la 0,1 la 73,7 tone pe an și o decontare de un an - de la 1,2 la 122,3 tone pe an).

A fost dezvoltată o tehnică pentru determinarea cantitativă a artemisininei în p. Grass printr-o metodă anuală HPLC-MS. Condițiile pentru prepararea probelor de materii prime pentru analiză pentru determinarea cantitativă a artemisininei sunt fundamentate științific.

Standardizarea materiilor prime a fost realizată, au fost elaborate proiectele FS - "Sivers Wormwood Herbal" și "Pelicula de un an de pelin".

Gradul de implementare. Metode de selecție a uleiurilor esențiale și analiza microscopică a datelor privind aprobate și puse în aplicare în cadrul Departamentului procesului educațional al VPO „Buriate Universitatea de Stat» Farmacie (№1 punerea în aplicare a Legii din 6 septembrie 2011). Proiectele FS pe iarba pelinului Sivers și pelinul de un an sunt pregătite pentru examinare.

La apărare sunt scoase:

• rezultatele studiului structurii anatomice, stocurilor, criteriilor de autenticitate ale Sivers și P., crescând în Buryatia;

• rezultatele unui studiu chimic al substanțelor biologic active și dinamica lor de acumulare sezonieră;

• rezultatele studiilor asupra standardizării părții de sus a solului Sivers p. Și p. Un an.

Aprobarea muncii. Principalele prevederi ale tezei au fost prezentate și discutate la: o conferință științifico-practică cu participare internațională "Dezvoltarea medicinei tradiționale în Rusia: experiență, cercetare, perspective" (Ulan-Ude, 2010); Al șaptelea simpozion de iarnă privind chimiometria "Metode moderne de analiză a datelor" (Saint-Petersburg, 2010); conferința științifică internațională dedicată celei de-a 15-a aniversări a Universității de Stat din Buryat, "Studii reale ale orașului Baikal Asia" (Ulan-Ude, 2010); Conferința internațională științifico-practică "Prioritățile și trăsăturile dezvoltării regiunii Baikal" (Ulan-Ude, 2011); X conferință științifico-practică internațională "Probleme de botanică din Siberia de Sud și Mongolia" (Barnaul, 2011); IV All-Russian Conference "Noi progrese în chimie și tehnologie chimică a materialelor vegetale" (Barnaul, 2009); Conferința internațională a studenților, studenților postuniversitari și a tinerilor cercetători "Lomonosov-2009" (Moscova, 2009); Conferința internațională a studenților ecologici "Ecologia Rusiei și a teritoriilor adiacente" (Novosibirsk, 2010); II Conferința științifico-practică a studenților, absolvenților și tinerilor oameni de știință "Tehnologii și echipamente ale industriei chimice, biotehnologice și alimentare" (Biysk, 2009); Conferința științifico-practică "Vegetația"

Regiunea Baikal și teritoriile adiacente "(Ulan-Ude, 2011); Seminarul școlar al tinerilor oameni de știință din Rusia "Probleme de dezvoltare durabilă a regiunii" (Ulan-Ude, 2009); conferința științifico-practică regională cu participare internațională "Tehnologii și materiale care protejează mediul și resursele" (Ulan-Ude, 2010).

Lucrarea a fost realizată ca parte a proiectului de cercetare: RFBR: 08-04-90202-Mong_a „Cercetări legi biogenetice biosinteza compușilor bioactivi din plante endemice din Asia Centrală“, 08-04-98037-r_sibir_a „Compoziția chimică a plantelor ca un indicator (2008-2009). starea ecosistemelor din regiunea Baikal "(2008-20 Yugg,); proiectul de integrare interdisciplinară nr. 93 "Dezvoltarea cercetării în domeniul chimiei medicale și farmacologiei ca bază științifică pentru dezvoltarea drogurilor domestice"; un proiect comun cu Academia de Științe din Mongolia "Obținerea de noi forme lipo-și nanozomale de droguri care utilizează materii prime naturale"; RFBR: 10-03-16001-mob_ros "Mobilitatea tinerilor oameni de știință" (2010), 11-03-90705-mob_st Lucrări științifice (instruirea) tinerilor oameni de știință ruși în organizațiile științifice principale ale Federației Ruse 2011 (2011).

Publicații. Potrivit rezultatelor, s-au publicat 17 lucrări științifice, dintre care 3 au fost publicate în reviste recomandate de Comisia Superioră de Atestare a Ministerului Apărării și Științei al Federației Ruse.

Domeniul și structura tezei. Lucrarea de disertatie este prezentata pe 172 de pagini de text scris si cuprinde introducerea, revizuirea literaturii (1 capitol), partea experimentala (4 capitole), concluziile generale, lista referintelor si aplicatiilor. Lucrarea este ilustrată cu 37 de tabele și 61 de figuri. Indicele bibliografic include 139 de surse, dintre care 42 străine.

În introducere, relevanța temei este fundamentată, scopul și obiectivele cercetării sunt formulate, sunt prezentate noutatea științifică și semnificația practică a lucrării.

Primul capitol (revizuirea literaturii) prezintă date despre compoziția chimică, spectrul activității farmacologice, utilizarea genului Artemisia L. în practica medicală tradițională și modernă.

Al doilea capitol (materiale și metode) prezintă date despre obiectele de studiu, metodele utilizate, dispozitivele și reactivii, alte informații metodologice.

Al treilea și al patrulea capitol oferă date privind studiul semnelor anatomice și diagnostice ale lui Severs S și al unui an de vârstă de un an. Prin metoda

Spectrofotometria UV a determinat conținutul total de flavonoide și tanini în obiectele de studiu. Cu ajutorul GC-MS, a fost investigată compoziția calitativă și cantitativă a uleiului esențial și a acizilor grași din pelin. Metoda HPLC-MS a stabilit conținutul calitativ și cantitativ al flavonoidelor. Compoziția elementară a plantelor a fost determinată prin metoda AAS. A fost elaborată și propusă o tehnică pentru cuantificarea conținutului de artemisinină. prin HPLC-MS. În plus, am studiat compozițiile chimice ale uleiurilor esențiale din cinci specii de Artemisia, cele mai frecvente în Buriatia și Mongolia - Gmelin pelinul Artemisia gmelinii Web. et Stechm., pelin, gri Artemisia glauca Pall, ex Wild, pelin, Artemisia macrocephala Jacq. ex Bess., Sievers pelin Artemisia sieversiana Willd. și Artemisia annua L.

Cel de-al cincilea capitol oferă date despre standardizarea plantei Sivers și P. de la vârsta de un an, propuse ca surse promițătoare de chamazulene și, respectiv, artemisinin.

Conținutul principal al lucrării

Obiecte și metode de cercetare. Obiectele de studiu au fost probe de iarbă n. Sievers și n. Anual, colectate în diferite regiuni ale Republicii Buryatia (Ivolginsky, Baikal, Selenga, Tunkinsky, Zakamensky, Kurumkansky) regiunea Irkutsk (din. Olkhon) și Mongolia (Selenge aimag), în perioada din 2008 până în 2011

Analiza microscopică a fost realizată în conformitate cu articolul "microscopic Analiza Tehnica" (GF XI, No. 2) La un microscop Mikmed (Lomo, Rusia), cu un ocular 10x; lentile 4x, 10x, 40x și MS-300 (TFXS), set de sisteme fluorescente (Micros, Austria) cu un ocular 10x; lentile 4x, 10x, 40x. Producția de materii prime a fost determinată prin metoda siturilor contabile.

Extracția uleiului esențial s-a efectuat prin hidrodistilare, extractele s-au obținut prin extracție cu ultrasunete, extracție și macerare cu CO2.

Studiul compoziției calitative și cantitative a acestor obiecte a fost realizat prin următoarele metode - GC-MS, HPLC-MS, TLC, BC, spectrofotometrie UV și AAS. Analiza spectrometrică-GC în masă a fost realizată pe Agilent 6890 gaz cromatograf cu un spectrometru de masă cuadrupol, USA HP MSD 5973N (Agilent Technologies, coloană: HP-5ms, g = 0,25 mm, grosimea filmului 0,25mkm (copolimer - 5% difenil - 95% dimetilsiloxan) și DBWax cu un diametru interior de 0,25 μm, gaz purtător - heliu, g) debit 1-1,5 ml / min; Analiza HPLC-MS s-a efectuat pe cromatografe lichide de înaltă performanță Finnigan Surveyor (Thermo Scientific, USA) și Agilent 1200 (Agilent Technologies,

USA) cu masa - selectiv detector «LCQ Advantage MAX“ ( "capcana de ioni") marca «Finnigan» (Thermo Scientific, USA) și cu detecție în tandem cu spectrometria de masă ( "capcana de ioni") 6330 (Agilent Technologies, USA), o metodă ionizare electrospray; Condiții: Coloana HYPERSIL aur CL8, 5 microni, 150x4 mm (Thermo Corporation electronic, SUA) și Zorbax Eclipse C18, 5 um, 4,6 x 150 mm (Agilent Technologies, USA), debitul volumetric al eluentului - 0,5 ml / min. Analiza TLC s-a efectuat pe plăci Sorbfil PTSH-P-A-UV (Imid Ltd, Rusia); Analiza BC a fost efectuată pe hârtie FN 6 (Filtrak, Germania); Spectrele de absorbție au fost înregistrate pe un StellarNet verde Waiv (StellarNet Inc, SUA), analiza AAC a fost realizată cu un spectrofotometru MB SOLAAR (Thermo Scientific, SUA) și Modelul AA240 Varian (Varian, Rusia).

Procesarea statistică a datelor experimentale a fost efectuată prin metoda variației-analiză statistică. O parte din date au fost prelucrate de CIM (pachetul software Sirius versiunea 6.0, Pattern Recognition Systems, a / s, Norvegia).

Caracteristicile farmacognitive ale plantei medicinale de P. Sivers și P. de vară. Următorii indicatori ai calității materiilor prime medicinale. Sivers iarba din pelin. Materii prime întregi. Grunduiri cu tulpini de înflorire care nu au o lungime mai mare de 45 cm, care nu conține părți abrupte ale tulpinii. Stem pubescente, drepte, nervurate și ramificate. Frunzele radicale și medii sunt petiolate, laterale triunghiulare, triunghiulare de trei ori pe spate, lungi de 1,4 - 2,5 cm, lățime 0,1 - 0,5 cm. Coșuri hemisferice, 0,4 - 0,6 cm în diametru, lățime inflorescența paniculată. Edge pistillate flori (există aproximativ 18). Flori bisexuali, numeroase, cu corolă în formă de pâlnie.

Iarbă de pelin anual. Materii prime întregi. Grunduiri cu tulpini de înflorire, de maximum 50 cm, care nu conțin părți grosiere ale tulpinii. Stema este goală, dreaptă, brăzdată, verde la începutul sezonului de vegetație, purpuriu închis la sfârșit. Frunza frunzelor inferioare și mijlocii este ovoidă sau ovală, de 1,5-7,0 cm lungime pe peolă, eliptică în lungime, fără aripi, de trei ori supraexprimată în segmente mari, segmente și segmente, lungime de 0,5 până la 0,8 cm, mai mult de 0,2 cm. Coșuri cu un diametru de aproximativ 0,2 cm în inflorescență paniculată.

La efectuarea unui studiu anatomic al ierbii P. Sivers și P. de un an, au fost identificate o serie de caracteristici anatomice și diagnostice. Structura frunzelor pelinului este prezentată în tabelul 1. Talia pelinului Sivers este grosieră, celulele epidermice alungite.

Există glande de ulei esențial, fire de păr în formă de T și celule stomatale rotunjite. Tulpina are o structură de tip bundle. În coaste sunt zone ale celor subțiri. Grinzile collanterale dispuse într-un cerc sunt caracterizate de sclerenchyma puternic dezvoltat. Endoderm bine marcat, format din celule mari, cu pereți subțiri de formă rotundă, strâns adiacente unul de celălalt.

Caracteristicile structurii anatomice a frunzelor p. Sivers și p. Un an __

Sivers pelin epidermă pelin anual

perete drept drept

perete inferior de bobinaj redus anvil

tip de aparat Ustigichesky anomocitic superior

inferior anomocitic, stomata mai mult decât pe partea superioară a frunzei

stomata forma ovala cu celule stomatale lentile

Caracteristicile părului dens pubescent cu părul în formă de T alcătuit din picioarele cu două, patru celule și firele de păr multicelulare, sunt două tipuri de fire de păr - stelate și în formă de T cu un picior multicelul

structurile care conțin terpenoid sunt ganglioni multicelulari, mari de ulei esențial. recipientele schizogenice și celulele parenchimale nespecializate

la vârsta de un an, cu caneluri, aproape goale, cu celule alungite de epidermă. În tulpina de vârstă de un an, precum și în tulpina s. Sivers, un tip de puchovie de structură, există glande uleioase esențiale, fire de păr rare și celule ovale stomatale; În ambele tipuri de pelin, celulele epidermale de pe corola florilor tubulare sunt cu pereți subțiri, alungite cu capete ascuțite, caracterizate prin prezența unui număr mare de glande de ulei esențial și absența firelor de păr.

Indicatorii de merchandising au fost stabiliți pe mai multe loturi de materii prime:

Sivers iarba din pelin. Umiditate (nu mai mult de 7%), cenușă totală (nu mai mult de 11%), cenușă insolubilă în acid clorhidric 10% (nu mai mult de 2%), substanțe extractive (nu mai puțin de 33%); ), impurități organice (nu mai mult de 2%), impurități minerale (nu mai mult de 0,5%).

Iarbă de pelin anual. Umiditate nu mai mult de 7%, cenușă totală (nu mai mult de 9%), cenușă insolubilă în acid clorhidric 10% (nu mai mult de 1%), substanțe extractive (nu mai puțin de 42%), frunze maronii și negri (nu mai mult de 5% impurități organice (nu mai mult de 2%), impurități minerale (nu mai mult de 0,5%).

Conform rezultatelor unei analize preliminare fitochimice, au fost găsite uleiuri esențiale, flavonoide, tanini, acizi hidroxicinamici, cumarini, acizi grași și lactoni de sesquiterpen, în iarba lui Sivers și P.

Stocurile Sivers și P. de un an. Tabelul 2 furnizează date privind randamentele, rezervele biologice (BZ) și rezervele operaționale (EZ) ale Sivers și, anual, crescând în diferite zone din Buryatia.

Stocurile de materii prime din s. Sivers și p. De un an în zonele din Buryatia

suprafața de recoltare (g / m2) totalul supraîncărcării E, (ha) BS (kg) EZ (kg)

env. Orașul Gusinoozersk 58,0 ± 4,1 0,8 530,0 398,4

env. a. Ganzurino 33,8 ± 2,4 0,4 154,4 116,0

env. a. Borați 220,6 ± 15,1 20,0 50160,0 41100,0

env. cu Taphar 500,0 ± 26,3 0,5 2763,0 2237,0

env. a. Sotnikovo 240,2 ± 19,4 25,0 69750,0 52850,0

env. Ulan-Ude 500,0 ± 32,5 0,5 2815,0 2175,0

Districtul Kabansky 285.SH = 19,7 30,0 97320,0 73680,0

Regiunea Tunkinsky 70,0 ± 8,0 0,2 172,0 108,0

Pribaikalsky District 280,9 ± 25,3 1,0 3315,0 2297,0

Râul Kurumkansky 370,6 ± 34,0 0,1 438,6 302,6

env. a. Hurumsha 228,0 ± 10,8 0,6 1497,6 1238,4

env. Populație 500,0 ± 46,2 30,0 177720,0 122280,0

env. a. Sotnikovo 39,0 ± 2,1 25,00 10800,0 8700,0

Districtul Kabansky 400,0 ± 27,1 30,0 136260,0 103740,0

Productivitatea părții superioare a pelinului Sivers și anualele p. În pășunile studiate variază de la 33,8 ± 2,4 până la 500,0 ± 32,5 g / m2 și de la 39 ± 2,1 la 500 ± 46,2 g / m2. Rezervele biologice și operaționale ale părților supraterane ale plantelor studiate sunt 154,4-97320,0 kg și 116,0-73680,0 kg (pelinul Sivers), 1,497,6177720,0 kg și 1238,4-122280,0 kg (pelinul anual).

Studiul chimic al plantei P. Sivers și P. a Flavonoidelor anuale. Conținutul total cantitativ al flavonoidelor a fost determinat prin metoda general acceptată de determinare spectrofotometrică în iarbă a Sivers și P. anuale, în termeni de luteolin-7-glucozid în diferite faze ale dezvoltării plantelor (vegetație, înflorire, înflorire, fructare). Cel mai mare conținut de flavonoide a fost stabilit în eșantioanele de Severs și eșantioane vechi de un an colectate în faza de înmugurire - 0,68 și 0,66%, cel mai mic - în materiile prime colectate în faza de fructare - 0,31% și 0,38% (Tabelul 3).

Conținutul cantitativ al cantității de flavonoide în termeni de luteolin-7-glucozid în iarba lui P. Sivers și în iarba lui P. de un an în funcție de faza de vegetație

faza de dezvoltare a plantei, cantitatea de flavonoide, în termeni de luteolin-7-glucozid (%)

Pelinul Siver anual pelin

vegetație 0,67 ± 0,02 0,64 ± 0,04

creștere 0,68 ± 0,05 0,66 ± 0,03

înflorire 0,48 ± 0,03 0,52 ± 0,02

fructat 0,31 ± 0,01 0,35 ± 0,01

Următoarele flavonoide au fost detectate prin metoda HPLC-MS: rutină, luteolin-7-glucozidă, chryo-eriol, quercetin în iarba Sivers și în iarba de un an (fig.1).

Fig.1. Cromatograma flavonoidelor și P. Sivers, P. un an.

Metoda standard extern a fost utilizată pentru a determina conținutul cantitativ al rutinei, chryseriolului, quercetinului în iarba lui Sivers și în iarba unui vechi de un an (Tabelul 4).

În ambele tipuri de pelin, luteolin-7-glucozidul 0,04-0,08% (Sivers) și 0,88-1,77% (n. Un an) este conținut în cea mai mare cantitate, quercetin 0,001% (Sivers) și 0,0070,009%. anual).

Conținutul cantitativ de flavonoide (HPLC-MS)

Sivers Colectia de vâscã de pene (%)

rutină quercetin luteolin-7-glucozidă

Cartierul Ivolginsky, okr. a. Taphar, 0,002 ± 0,0001 0,001 ± 0,0002 0,040 ± 0,003

Cartierul Ivolginsky, okr. p. Sotnikovo 0,002 ± 0,0002 0,001 ± 0,0001 0,080 ± 0,005

FLY este de un an și districtul Ivolginsky, okr. p. Sotnikovo 0,018 ± 0,001 0,007 ± 0,0003 0,880 ± 0,004

Districtul Kabansky, okr. a. Bătăi de captivitate 0,012 ± 0,002 0,009 ± 0,0003 1,700 ± 0,005

Acizi grași. Eșantioanele de pelin conțin de la 8 la 13 acizi grași. Frecvente pentru ambele specii sunt acizi palmitic (16: 0), linoleic (18: 2p6), linolenic (18: ZpZ), în cantitate de 56,87-82,67% (din totalul acizilor grași) în Severs, 58,36-67,19% în n. un an (din totalul acizilor grași). În plus față de acești acizi, o cantitate semnificativă conține acid 10-octadecenic (18: 1 p8) de la 3,64% până la 11,65%. De asemenea, în toate probele au fost detectate acizii 10-metil-undecanoici (12: 0) și 12-metil-tetradecanoic (și 15: 0), conținutul lor nu depășește 1%. Cromatogramele sunt prezentate în figura 2.

Fig. 2. Chromatograme ale acizilor grași (a) p. Sivers și (b) p. Un an (I - (16: 0), 2- (18: 2n6) ).

Compoziție elementară. În iarba p. Sivers, care crește în diferite regiuni ale Buryației, conținutul de calciu este de 0,56 ± 0,02-0,89 ± 0,03%, magneziu - 0,12 ± 0,01-0,28 ± 0,01%. Cel mai mare conținut de calciu și magneziu se înregistrează în probele colectate în districtul Kurumkansky, cel mai mic conținut de magneziu din materiile prime din districtul Tunkinsky și calciul din plante colectate în districtul Selenginsky. Fierul se găsește în majoritatea plantelor din regiunea Kurumkansky

(141,25 ± 12,13 mg / kg), mai puțin - din districtul Selenginsky (141,25 ± 12,13 mg / kg).

Conținutul de zinc variază de la 23,73 ± 1,56 la 59,8 ± 1,56 mg / kg - п. Sivers și de la 55,32 ± 0,83 la 66,50 + 0,89 mg / kg este de un an, ceea ce este acceptabil pentru funcționarea normală a proceselor biochimice. Conținutul de cupru este de 8,42 ± 0,45-24,30 ± 1,56 mg / kg -n. Sivers, 9,37 + 0,18-13,48 + 0,44 mg / kg - vârstă de un an (cantitatea necesară este de la 5 la 30 mg / kg). Nichelul din iarba Seabera conține 0,40 ± 0,01 -2,06 ± 0,03 mg / kg, ceea ce corespunde unei rate de necesitate a plantelor de 0,1 până la 5 mg / kg. Conținutul de cobalt din instalație nu trebuie să depășească 1 mg / kg, plumb - 10 mg / kg, cadmiu - 0,2 mg / kg, crom - 1,0 mg / kg (Kabata-Pendias 1989, Kashin 2009). La Sivers p. Conținutul de cobalt este mai mic de 0,3 mg / kg, plumbul este de 3,19 ± 0,11 mg / kg, în p. Un copil de 0,59 ± 0,02 mg / kg, cadmiu 0,18 ± 0,02 mg / kg, crom 0,76 ± 0,02 mg / kg în toate probele. Astfel, conținutul de macro și micronutrienți este în concentrații care sunt normale și suficiente pentru fluxul de funcții vitale pentru plante.

Siver ulei de plante medicinale din pelin. Uleiul esențial din plante a fost izolat prin metoda farmacopeică nr. 2. În diferite probe de p. Sivers conținutul de ulei esențial este cuprins între 0,1 și 1,9%. În uleiurile esențiale ale Sivers, care cresc în diferite părți ale Burii, au fost identificate mai mult de 80 de compuși.

Am investigat compoziția uleiurilor esențiale izolate din iarba pelinului Sivers, care crește în diferite părți ale Buryatia

(Ivolginsky (1), Selenginsky (2), Kurumkansky (3), Pribaikalsky (4.9),

Tunkinsky (5), districtele Zakamensky (8)), regiunea Irkutsk (insula Olkhon) (6) și Mongolia (7). Cel mai mare randament al uleiurilor esențiale este în pelinul Sivers care crește în regiunile Tunkinsky și Kurumkansky (0,4%). Cantitatea minimă de ulei a fost izolată din plantele colectate pe teritoriul regiunilor Zakamensky, Pribaikalsky și Mongoliei (0,1%) (figura 3).

Dinamica acumulării de ulei esențial a fost studiată în funcție de faza dezvoltării plantelor (figura 4). Rezultatele au arătat că în cea mai mare cantitate de ulei se acumulează în faza de înflorire (0,6%), în

Fig. 3. Randamentul uleiului esențial p. Sivers de la locul de creștere.

fazele de înmugurire și fructare acumulează aceeași cantitate de ulei esențial (aproximativ 0,3%).

1,8-daneol-1-terpineal-4-3-p-farmacin-1-sina-4,11-

Fig. 5. Cromatograma uleiului esențial p. Sivers.

Fig. 4. Randamentul uleiului esențial p.

Siver în diferite faze ale dezvoltării plantelor (sezon în creștere, b - înflorire, c - înflorire,

Toate componentele uleiului esențial pot fi împărțite în două grupe - constante, adică găsite în ulei în toate fazele dezvoltării plantelor și care apar în mod sporadic (minor). În toate probele de ulei esențial de la Sivers, indiferent de zona de creștere a plantelor, 1,8-cineol (2,34-22,57%), terpineol-4 (0,964,70%), germacren E (8,66-12,36%), P-farnezen (0,64-5,17%), Selina-4,11-dienă (0,97-4,66%), Neril-2-metilbutanoat (4,80-8,79%) și Chamazulene (0,60-25,36%) (Figura 5).

Uleiurile esențiale, izolate din plante crescute în regiunile de stepă, în cartierul Pribaikalsky (25,36%), conțin cea mai mică cantitate de hamazulene, iar cea mai mică - în districtul Zakamensky (0,60%).

În compoziția uleiului esențial izolat din plante în diferite faze de dezvoltare - vegetație, înmugurire, înflorire și fructare, s-au identificat 54 de compuși. Componentele constante sunt 1,8-cineol, linalool, terpineol-4, a-terpineol, p-farnezen, selina-4,11-dienă, chamazulene.

Conținutul de chamazulen variază de la 0,20 până la 24,69% în faza de vegetație, de la 21,34 la 61,91% în faza de înmugurire, de la 1,53 la 34,42% în faza de înflorire, de la 10,87 la 20,64% în faza de fructare. Setul de componente care apar în mod sporadic este semnificativ (până la 40 de compuși), în același timp scăzut în conținutul lor cantitativ, prin urmare este dificil să se identifice dependența compoziției lor de faza de dezvoltare a plantelor.

Pentru a evalua influența fazei de dezvoltare asupra componentelor uleiului s-a utilizat CIM (Figura 6).

Fig. 6. Model GK în funcție de compoziție

ulei esențial din faza de dezvoltare a Sivers (I-vegetație, 2-înflorire, 3-înflorire, 4-fructare)

aceasta este una dintre analize

datele multidimensionale, permitând alocarea variabilelor ascunse în matricele de date mari și analizarea relațiilor,

existente în sistemul studiat. Scopul metodei principale a componentei este de a înlocui descrierea originală a eșantioanelor folosind variabilele p pentru o formă nouă, reprezentată în spațiul componentelor principale (Esbenson, 2010).

Pe modelul GK este posibil să se facă distincție între zonele separate delimitate între ele și care corespund diferitelor faze de dezvoltare a pelinului Sivers, ceea ce indică faptul că compoziția untului în diferite faze de dezvoltare diferă în conținutul compușilor minori.

Astfel, în diferite faze ale dezvoltării Sivers, compoziția calitativă a uleiului esențial coincide constant și diferă în compuși minori.

Un studiu privind fazele dezvoltării plantelor a arătat că cea mai mare cantitate de chamazulen din uleiul esențial din Seversa este concentrată în fazele de înflorire și înflorire, în timp ce acumularea de ulei în faza de înflorire este mai mare decât în faza de înflorire. Prin urmare, în aceste faze, am studiat particularitățile acumulării de uleiuri esențiale în diferite părți ale plantei (figura 7).

Despre faza de înflorire În faza de înflorire

Fig. 7. Randamentul uleiului esențial în diferite părți ale Sivers.

extractul de ulei esențial din diferite părți ale plantelor în faza de înflorire a arătat că inflorescențele (coșurile) sunt caracterizate de randamentul cel mai mare, frunzele sunt mai mici, iar tulpinile sunt minime. În fază

în iarbă de P. Sivers este mai presus de toate conținutul de ulei în boboci, puțin mai puțin în frunze și cantitatea minimă de ulei în tulpini.

O analiză a uleiului esențial din diferite părți ale plantei a arătat că compoziția componentă a uleiului extras din inflorescențe și muguri de iarbă a lui Sivers este cea mai diversă este mai mult de 70 de componente, apoi mai mult de 40 de componente din frunze și mai puțin decât toți compușii din ulei extras din tulpini sunt de aproximativ 20 componente. Componentele constante ale probelor de ulei esențial, indiferent de locația lor, sunt 1,8-cineol, linalool, terpineol-4, germacren 13, a-terpineol, a-bisabolol și chamazulen (Tabelul 5).

Componentele constante ale uleiului esential de pelin Sivers

componente componente ale componentelor în% din întregul ulei

în faza de înflorire

inflorescențe frunze tulpini muguri frunze frunze

1,8-cineol 8,00 6,39 6,04 1,94 + 23,41

linalool 5,93 1,38 0,65 + + 3,83

terpineol-4 2,56 2,10 0,57 0,88 + 5,37

a-terpineol 2,39 2,10 0,82 1,44 + 4,66

Germakren E 7,20 7,81 1,96 11,18 7,81 10,57

a-bisabolol 2,28 1,25 1,66 5,24 10,93 5,86

Chamazulene 6,23 23,02 37,11 7,81 21,17 3,51

Analiza a arătat că, în diferite zone de creștere, la diferite faze ale dezvoltării și în diferite părți ale Seversa, compoziția calitativă a uleiului esențial coincide în mod constant și diferă în compușii cu aspect sporadic.

Ulei esențial din plante aromatice anuale. Ca și în primul caz, selecția uleiului esențial a fost efectuată prin metoda farmacopeei nr. 2. Compoziția chimică a uleiurilor esențiale anuale este reprezentată de 40 de componente. Componentele constante sunt artemisia cetonă (10,24-14,62%), cariofilină (9,93-10,71%), germacren B (3,53-7,82%), p-selenen (21,75-29,46%), oxid de karyofilen (4,44-14,31%) (Fig. 8).

În diferite stadii de dezvoltare a plantelor, 0,5 - 0,7% ulei esențial este extras din planta pelinului. Cea mai mare randament de ulei esential in faza de inflorire (0,7%) (Fig.9).

În toate etapele de dezvoltare a plantelor, în uleiul esențial sunt conținute artemisia cetonă, karyofilen (3-seleniu, oxid de cariopilenă) Conținutul cantitativ al componentelor principale în diferite faze ale evoluției plantelor se modifică Conținutul de cetonă artemisie este mai mare în faza de fruct, P-selenen - și oxidul de karyofilen - în faza de înflorire.

3. Cromatograma uleiului esential p. Un an.

Fig. 9. Randamentul uleiului esențial p. Anual în diferite faze ale dezvoltării plantelor (în vegetație, b-bud, c-înflorire, p-fructare).

Glandele de ulei esențial sunt distribuite inegal în plantă, prin urmare, din diferite părți ale plantei, se pot distinge uleiurile esențiale, care diferă atât cantitativ cât și calitativ.

Au fost determinate particularitățile acumulării uleiurilor esențiale în faza de înflorire în diferite părți ale pelinului anual (Fig.10).

Mai mult de 60 de compuși au fost găsiți în uleiurile esențiale din diferite părți ale plantei. constant

componente pentru uleiuri de la inflorescențe, frunze, tulpini sunt artemisia alcool, p-cariofilen, oxid

Componenta principală a uleiului esențial anual este cetona artemisie - nu se găsește în ulei din tulpini, deși este de jumătate din ulei din inflorescențe (49,14%) și aproape o treime din frunze (29,76%).

Analiza uleiurilor esențiale a arătat că, în diferite zone de creștere, în diferite faze ale dezvoltării și în diferite părți ale ierbii anuale, precum și n. Sievers iarba, compoziția calitativă a uleiului esențial este aceeași în componentele constante și diferite în componentele care apar în mod sporadic.

Dezvoltarea unei metode de determinare cantitativă a artemisininei în pelin printr-o metodă anuală HPLC-MS

Selectarea condițiilor pentru extragerea cantitativă a artemisininei din pelinul anual. Dezvoltarea unei metodologii cantitative

1 2 din Fig. 10. Randamentul uleiului esențial în diferite părți ale anuale (1 inflorescență, 2 frunze, 3 tulpini).

S-au selectat determinările de artemisinină în iarba de P. în condiții de extracție vechi de un an, în care extracția artemisininei atinge valoarea maximă. Au fost analizate extractele obținute prin metodele de macerare, extracție cu ultrasunete și extracție subcritică de CO2. Diferiți solvenți au fost utilizați ca extractanți (Tabelul 6). Conținutul de artemisinină în extracte separate prin extracție cu ultrasunete și macerare utilizând diferiți solvenți nu este semnificativ diferit (0,038-0,040%). Cea mai mare cantitate de artemisinină (0,054%) este conținută în extractul obținut în timpul extracției subcritice de CO2.

Metode și parametri pentru extracția extractelor din iarba pelinului de un an prin diferite metode de extracție ______

metoda extracției timpul de extracție a extractorului / parametrii de extracție conținutul de artemisinină în%, în termeni de a.s.s.

etanol 24 ore / raport de materii prime: solvent (1: 5), T = 25 ° C 0,040 ± 0,002

Macerarea etanolului 48 h / raportul dintre materiile prime: solvent (1: 5), T = 25 ° С 0,038 ± 0,002

Hexan 24 h / raportul probei: solvent (1: 5), T = 25 ° C 0,039 ± 0,002

acetat de etil 15 min / raport de materii prime: solvent (1: 5), frecvență de sondare 50 kHz, T = 25 ° С 0,022 ± 0,001

etanol 5 min / raport de materii prime: solvent (1: 5), frecvență sonoră 50 KHz, T = 25 ° С 0,022 ± 0,001

Extracția ultrasonică a etanolului 10 min. / Raportul materiilor prime: solvent (1: 5), frecvența sunetului 50 KHz, T = 25 ° С 0,024 ± 0,001

etanol 15 min / raport de materii prime: solvent (1: 5), frecvență sonoră 50 KHz, T = 25 ° C, C 0,039 ± 0,002

etanol 20 min / raport de materii prime: solvent (1: 5), frecvență sonoră 50 kHz, T = 25 ° С 0,039 ± 0,002

Extragerea CO2 de CO2 24 h.1 debit 30 l / h, T = 20-22 ° C, P = 6,0-6,2 MPa 0,054 ± 0,003

Dintre toate metodele de extracție propuse, extracția cu ultrasunete este optimă (extractant de etanol), deoarece această metodă este rapidă (timp de extracție 15 minute) și disponibilă prin instrumente.

Metoda de determinare cantitativă a artemisininei.

Dezvoltarea unei tehnici de determinare cantitativă a artemisininului în planta anualei a fost realizată prin HPLC-MS. Am folosit Agilent 1200 HPLC cu un detector MC ("capcana de ioni") 6330, o metoda de ionizare - electrospray. Eliminarea a fost efectuată în mod izocratic (50% (A): 50% (B)), compoziția tamponului inițial (A) -da soluție apoasă de acid formic (pH = 3) + 2 ml soluție saturată de acetat de amoniu, acetonitril. Debitul volumetric al eluentului este de 0,5 ml / min, volumul probei injectate este de -25 μl. Ioni au fost înregistrați în modul de monitorizare al ionilor încărcați pozitiv (SRM) cu o masă de 300 (datorită adăugării ionului NrH4 la molecula artemisininei), lățimea ferestrei (299301) m / z. Rezultatele au fost confirmate prin spectrometrie de masă tandem, un ion fiică (MS2) cu o masă de 223 m / z a fost obținut din ionul părinte (MS) cu o masă de 300 m / z.

Coincidența timpilor de retenție și a spectrelor de masă ale artemisininei, determinată în iarba de un an cu utilizarea soluției de CO a compusului indicat, ne permite să concluzionăm că compusul pur este identic cu artemisinina pură (Fig.11,12).

Fig. 11. Cromatograma extrasului anual de CO artemisinină și P.

iv ix язтжяауат ассс »

Figura 12. Spectrele de masă ale a) artemisininei conținute în n. Iarbă anuală, b) de artemisinină CO.

Pentru spectrometria de cromatografie de masă, a fost utilizată o metodă de calibrare absolută pentru analiza cantitativă. Pentru a determina coeficientul curbei de calibrare, s-au preparat mai multe (cel puțin 20) soluții de calibrare ale artemisininului. Prepararea soluțiilor a fost efectuată după cum urmează: 5 x 10-3 g artemisinină au fost cântărite, plasate într-un balon volumetric de 50 ml, s-au adăugat 25 ml de acetonitril.

se amestecă bine până la dizolvarea completă, după care volumul din balon se aduce la semn cu apă distilată. Analiza efectuată la un volum diferit al probei injectate de la 1 la 40 μl. Aria de vârf a cromatogramelor a fost măsurată. Conform datelor obținute, a fost construită o curbă de calibrare (figura 13). Valorile suprafeței vârfurilor au fost reprezentate pe axa de coordonate, iar valorile corespunzătoare conținutului de artemisinină (g) au fost reprezentate pe axa absciselor.

Din datele obținute sa calculat coeficientul curbei de calibrare: k = B / х, unde k este coeficientul curbei de etalonare, 5 este aria vârfului soluției analizate, х este conținutul de artemisinină (g)

Coeficientul curbei de etalonare (k) este definit ca media aritmetică a coeficienților k,.

Fig. 13. Graficul de absolvire pentru determinarea conținutului de artemisinină.

Conținutul de artemisinină din extractul de pelin de un an a fost determinat prin formula: C = 5 / c, unde 5 este aria vârfului artemisininei în soluția analizată și k este coeficientul curbei de calibrare. Datele metrologice privind determinarea coeficientului curbei de etalonare (k) sunt prezentate în tabelul 7.

Caracteristicile metrologice ale calculului coeficientului curbei de calibrare artemisinin

1 X Э2 Э Р ЮУ) Дх Е,%

19 1,32 * 10m 1,84 * О15 4,25 * 10 "95 2,09 1,28 * 10" 1,97 1,90 * 10 "

Rezultatele determinării cantitative a artemisininei în extractul anual de pelin sunt prezentate în tabelul 8.

Rezultatele determinării cantitative a artemisininei în extractul de pelin pe o perioadă de un an HPLC-MS

Caracteristicile metrologice (n = 5, P = 95%)

0,039 0,75 * 10 "0,27 * 10" 2 2,57 0,83 * 10 ° 1,21 0,12 * 10 "

Metoda dezvoltată a determinat conținutul cantitativ al artemisininei în iarba n. Făt de un an în faza de înflorire (Tabelul 9). Tehnica este validată - specificitatea, confirmată cu precizie.

Conținutul de artemisinin în pelinul pelin anual

Suprafața Artemisinin și data colectării (%)

Cartierul Ivolginsky, la 10 km de Sotnikovo, 08.12.2010 0.054 ± 0.003

Ivolginhi rn, la 10 km de Sotnikovo, 08/22/2011 0.027 ^.001

Cartierul Ivolginsky, okr. a. Oriole, 08/19/2011 0,069 ± 0,004

Districtul Kabansky, okr. a. Tarakanovka, 08.02.2011 0,023 ± 0,001

În probele colectate în regiunea Ivolginsky, în vecinătatea Oriole conține cea mai mare cantitate de artemisinină (0,069%), cea mai mică - în eșantioane din districtul Kabansky, okr. a. Grătar (0,023%). Sa constatat că cea mai mare cantitate de concentrate de plante artemisinin în faza de înflorire - 0,039%, cea mai mică - în fazele de vegetație și de înflorire - de la 0,006 la 0,007%. Inflorescențele de artemisinin conțin - 0,029%, puțin mai puțin - 0,021% în frunze, iar cantitatea minimă în tulpini este de 0,007% (Tabelul 10).

Conținutul de artemisinin în iarba pelinului anual, în funcție de faza de vegetație, în diferite părți ale plantei

faza de dezvoltare a instalației

vegetație înmugurire înflorire frunze inflorescență tulpini

0,006 ± 0,0002 0,007 ± 0,0002 0,039 ± 0,003 0,021 ± 0,001 0,029 ± 0,002 0,007 ± 0,0002

Astfel, timpul optim pentru colectarea ierbii din pelinul anual este faza de înflorire și se recomandă colectarea întregii părți antene.

Toate rezultatele obținute sunt incluse în proiectele FS pe iarba pelinului Sivers și planta pelinului anual.

1. Au fost dezvăluite principalele caracteristici de diagnosticare a ierbii de iarbă de la Sivers și P. de un an, au fost elaborați indicatorii numerici necesari pentru standardizarea materiilor prime. Sunt identificate rezervele Sivers și P., care cresc în diferite zone ale Republicii Buryatia.

2. A fost stabilit conținutul de flavonoizi, acizi grași, macro și micronutrienți în iarba din Sivers n și în iarba n. Un an. Flavonoidele - luteolin-7-glucozidul, rutina, quercetinul și chryoeriolul au fost detectate prin metoda HPLC-MS în aceste plante. Principalii acizi grași din tipurile de pelin studiate sunt palmitic, linoleic, linolenic, acidul octadecenic 10% se găsește și în pelinul semnificativ.

3. Sa constatat că compoziția calitativă a uleiurilor esențiale de plante rămâne constantă indiferent de locul de creștere și de faza de dezvoltare. Componentele constante ale Sivers sunt 1,8-cineol, terpineol-4, D germacren, p-farnesen, selina-4,11-dienă, neil-2-metilbutanoat și chamazulene și Artemisia ketone, karyofillen, germacrene D, p-selenen, oxid caryophilic. Acumularea de ulei esențial în faza de înflorire este mai mare (0,7%) decât în faza de înmugurire (0,3%). Cea mai mare cantitate de Chamazulene p. Sivers se acumulează în fazele de creștere (până la 62%) și înflorire (până la 34%).

4. Au fost determinate condițiile de extracție a artemisininei (tipul de extractant, metoda de extracție, timpul de extracție) din planta anuală și sa stabilit că extracția maximă a artemisininei se obține cu extracție cu ultrasunete și precritică de CO2. O metodă de determinare cantitativă a artemisininei a fost dezvoltată și validată printr-o metodă HPLC-MS de un an (eroare relativă de determinare ± 1,21%). Sa constatat că cea mai mare cantitate de artemisinină din iarba unei plante anuale se acumulează în timpul fazei de înflorire a inflorescențelor (0,039%).

5. Elaborarea documentelor de reglementare pentru materiile prime - proiectul FS "Lamele pelinului de piatră" și proiectul FS "Iarbă de pelin de un an".

Lista lucrărilor publicate pe tema tezei

1. Zhigzhitzhapova, C.B. Compoziția chimică a uleiului esențial Artemisia gmelinii Web. et Stechm, originar din Asia Centrală / C.B. Zhigzhitzhapova, TE Soktoeva, LD Radnaeva și Chimia Plantelor.-2010.-№2.-С. 131-133.

2. Zhigzhitzhapova, C.B. Compoziția chimică a uleiului esențial din pelinul Sivers Artemisia sieversiana Willd., Cultivat în Buryatia / S.V. Zhigzhitzhapova, TE Soktoeva, LD Radnaeva, V.V. Taraskin // Buletinul Universității de Stat Buryat. Ser. Chimie-Fizica. - 2009. - Cu. 3. - p. 69-71.

3. Zhigzhitzhapova, C.B. Compoziția uleiului esențial din pelinul Siver Artemisia sieversiana Willd., Cultivat în Buryatia și regiunea Irkutsk / S. V. Zhigzhitzhapova, TE Soktoeva, LD Radnaeva, V.V. Taraskin // Buletinul Centrului Științifico-Siberian Est-Siberian al Academiei Ruse de Științe Medicale din Rusia. - 2009. - №2 (66). -C. 103-105.

4. Zhigzhitzhapova, S.V. Compoziția uleiului esențial Artemisia sieversiana Willd. la diferite faze ale dezvoltării plantelor / S.V. Zhigzhitzhapova, TE Soktoeva, LD Radnaeva // Buletinul Centrului Științific Estic-Siberian al Filiala Siberiană a Academiei de Științe Medicale din Rusia. - 2011. - №1 (77). Partea 2. - pag. 138-141.

5. Soktoeva, TE Compoziția componentă a uleiului esențial Artemisia glauca Pall, ex Willd. flora din Mongolia / T.E. Soktoeva, S.V. Zhigzhitzhapova, LD

Radnaeva, B.B. Taraskin // Buletin de tineri oameni de știință. - Tomsk, 2011. -Vyp. 2. - p. 27-30.

6. Soktoeva, TE Compoziția chimică a uleiului esențial Artemisia gmelinii Web. Et Stechm. / T.E. Soktoev // Lomonosov-2009: materiale ale celui de-al XVI-lea. Conf. studenți, absolvenți și tineri oameni de știință. - Moscova, 2009. - p. 37.

7. Zhigzhitzhapova, C.B. Ulei esențial de pelin Gmelin flora Buryatia și Mongolia / C.B. Zhigzhitzhapova, TE Soktoeva, LD Radnaeva // "Noile realizări în chimie și tehnologia chimică a materiilor prime vegetale": materiale din IV All-Rusia. științifice. Conf. - Barnaul, 2009. - p. 49-50.

8. Soktoeva, T.E. Compoziția uleiului esențial al pelinului Sivers Artemisia sieversiana Willd., Care crește în Republica Buryatia / T.E. Soktoeva, C.B. Zhigzhitzhapova, LD Radnaeva // "Tehnologii și echipamente pentru industria chimică, biotehnologică și alimentară": materiale de la II Vseross. Scien. Conf. studenți, absolvenți și tineri oameni de știință. - Biysk, 2009. - p. 91-93.

9. Pavlova E.T. Separarea cromatografică și determinarea cantitativă a componentelor medicamentelor prin HPLC / TE Soktoeva, T.A. Kolodin // "Probleme ale dezvoltării durabile a regiunii": materiale ale celui de-al șaselea școală-seminar pentru tinerii oameni de știință din Rusia. - Ulan-Ude, 2009. - p. 222-223.

10. Zhigzhitzhapova, S.V. Analiza comparativă a compozițiilor chimice ale Artemisia L., în creștere în Asia Centrală / S.V. Zhigzhitzhapova, T.E. Soktoeva, L.D. Radnaeva, O. Grahl-Nilsen "Metode de modem de analiză a datelor" Simpozionul de iarnă al șaptelea privind chimie. - Saint-Petersburg, 2010. - pag. 82-83.

11. Soktoeva, T.E. Analiza comparativă a compoziției uleiurilor esențiale din polinia din genul Artemisia L., cultivată în Asia Centrală / TE Soktoeva // "Tehnologii și materiale ecologice și de economisire a resurselor": materiale din regiune, științifice pentru tineret. Conf. de la Intern. participare. - Ulan-Ude, 2010.-S. 109-110.

12. Zhigzhitzhapova, C.B. Uleiuri esențiale de genul Arthurisia L. / C.B. Zhigzhitzhapova, TE Soktoeva, LD Radnaeva // "Dezvoltarea medicinei tradiționale în Rusia: experiență, cercetare, perspective": materiale nauchn. Conf. de la Intern. participare. - Ulan-Ude, 2010. - p. 405-407.

13. Soktoeva, T.E. Compoziția uleiului esențial al pelinului din pelin Artemisia sieversiana Willd. / T.E. Soktoeva, C.B. Zhigzhitzhapova, LD Radnaeva // "Studiile actuale ale lui Baikal Asia": materialele Internelor. Scien. Conf, Ulan-Ude, 2010. - pag. 309-312.

14. Badmaeva, E.E. Compoziția uleiului esențial Artemisia macrocephala Jacq. ex Bess, crescând în Mongolia / E.E. Badmaeva,

TE Soktoeva // "Ecologia Rusiei și a teritoriilor adiacente": materiale ale XV International. mediu con. - Novosibirsk, 2010. - p. 325.

15. Badmaeva, E.E. Compoziția uleiului esențial Artemisia annua / EE. Badmaeva, T.E. Soktoeva, C.B. Zhigzhitzhapova, LD Radnaeva // "Tehnologii ecologice și de economisire a resurselor": materiale Vseross. conferință de tineret de la Intern. participare. - Ulan-Ude, 2011. -C. 156-157.

16. Soktoeva, T.E. Extracția artemisininei din pelinul anual Artemisia annua L. / T.E. Soktoeva, G.L. Ryzhov, K.A. Dychko, V.V. Khasanov, C.B. Zhigzhitzhapova, LD Radnaeva // "Prioritățile și trăsăturile dezvoltării regiunii Baikal": materiale ale celui de-al V-lea internațional. Scien. Conf. - Ulan-Ude, 2011. - p. 127-128.

17. Zhigzhitzhapova, C.B. Compoziția chimică a Artemisia annua L. / C.B. Zhigzhitzhapova, TE Soktoeva, LD Radnaeva // "Vegetația regiunii Baikal și a teritoriilor adiacente": materiale din Vseross. Scien. Conf. - Ulan-Ude, 2011. - pag. 152-153.

Spectrofotometria de absorbție atomică AAS

saw absolut uscate

BAS substanțe biologic active

GZ rezervele biologice

BH cromatografia pe hârtie

OMS Organizația Mondială a Sănătății

HPLC-MS cromatografie lichidă de înaltă performanță

Farmacopeea de stat GF

Metoda ISC a principalelor componente

CO eșantion standard

acea cromatografie în strat subțire

Rezervele operaționale ale EZ

SRM Selectați monitorizarea reacțiilor

Autorul își exprimă recunoștința sinceră față de supraveghetorul de studii, dr. Prof. LD Radnaeva, precum și doctorat, conferențiar universitar, cercetător principal Institutul de Management al Naturii din cadrul Institutului de Management al Naturii din cadrul Institutului de Științe din Bihor, Zhigzhitzhapova C.B., Doctor în Chimie, Profesor Onorific Tomsk Universitatea de Stat Ryzhova G.L. pentru ajutor și sprijin în pregătirea tezei.

A fost semnat în print 11/21/2011. Format 60x84 1/16. Hârtie offset. Volum 1,5pech. l. Circulația 100. Numărul de ordine 67.

Imprimat în tipografia editurii BNTS SB RAS. 670047 Ulan-Ude, ul. Sakhyanova, 6.

Cuprinsul tezei lui Soktoev, Tuyana Erdemovna :: 2011 :: Ulan-Ude

Capitolul 1. REVIZUIREA LITERATURII

Stadiul actual de cercetare privind studiul genului Artemisia L.

1.1. Caracteristicile botanice ale pelinului Sivers și pelinului anual de 12 ani

1.2. Uleiuri esențiale și plante azulene naturale din genul Wormwood

1.2.1. Compoziția chimică a uleiurilor esențiale și azulenei naturale 14 din genul Wormwood

1.2.2. Utilizarea uleiurilor esențiale din plante din genul Wormwood în medicină

1.2. Artemisinin: descoperire, structură și sinteză, proprietăți fizico-chimice 31, mecanism de acțiune antiplasmodium

1.3. Compoziția acidului gras a plantelor din genul Wormwood

1.4. Compuși fenolici ai plantelor din genul Wormwood

1.5. Compoziția elementară a plantelor din genul Wormwood 38 CONCLUZII LA CAPITOLUL

CAPITOLUL 2. CARACTERISTICILE OBIECTELOR ȘI METODELOR 41 CERCETARE

2.1. Obiecte de studiu, eșantioane de materii prime - iarbă din pelinul Sivers și 41 ierburi de pelin anual

2.2. Metode de cercetare

2.2.1. Metode de cercetare biologică

2.2.1.1. Studiu anatomic și diagnostic

2.2.1.2. Cercetarea resurselor

2.2.2. Metode de determinare calitativă și cantitativă a 43 de substanțe biologic active

2.2.3. Analiza Merchandising: Metode pentru stabilirea a 50 de materii prime de bună calitate

2.2.4. Metode de prelucrare statistică. Metoda principală a componentelor.

CAPITOLUL 3. ANALIZA FARMACOGNICĂ A CIVERILOR DE HERBALI DE IERBAL 53

3.1. Analiza microscopică a ierbii pelinului Sivers

3.2. Sibers Stocuri din pelin

3.3. Studiul principalilor peluze de pelin BAS pelin

3.3.1. Conținutul calitativ și cantitativ al componentelor 64 de ulei esențial al pelinului Sivers

3.3.1.1. Compoziția chimică și dinamica acumulării de ulei esențial și 64 hamazulena în iarba pelinului Sivers în diferite zone din Buryatia

3.3.1.2. Particularitățile de acumulare a uleiului esențial și a chamazulenei în iarba de pelin 65 Sivers în diferite faze ale dezvoltării plantelor

3.3.1.3. Acumularea de componente minore ale uleiului esential al ierbii 71 Sivers pelin

3.3.1.4. Caracteristicile acumulării de ulei esențial și chamazulene în iarbă 72 Sivers pelin din diferite părți ale plantei

3.3.2. Conținutul calitativ și cantitativ de flavonoide și tanini din iarba pelinului Sivers

3.3.3. Compoziție de acid gras din iarbă din pelinul Sivers

3.3.4. Compoziția elementară a plantei pelinice anuale CONCLUZII LA CAPITOLUL

CAPITOLUL 4. ANALIZA FARMACOGNICĂ A BERCELOR DE IERBEL 83 DE UN ANI

4.1. Analiza microscopică anuală a pelinului de pelin

4.2. Stocuri de pelin anual

4.3. Studiul principal al pelinului de pelin anual BAS

4.3.1. Conținutul calitativ și cantitativ al componentelor uleiului esențial din pelinul de pelin anual

4.3.1.1. Compoziția chimică și dinamica acumulării de ulei esențial în 92 de iarbă de pelin de un an din diferite locuri de creștere

4.3.1.2. Particularitățile acumulării de ulei esențial în iarba pelinică anuală pe diferite faze de dezvoltare și în diferite părți ale plantei

4.3.2. Determinarea calitativă și cantitativă a ierbii flavonoide 100 pelin anual

4.3.3. Compoziția de acid gras din planta pelinică anuală ® ® *

4.3.4. Compoziția elementară a pelinului de pelin anual

4.4. Dezvoltarea unei metode de determinare cantitativă a artemisininei în 103 ierburi de pelin printr-o metodă anuală de HPLC-MS

4.4.1. Selectarea condițiilor pentru extracția cantitativă a artemisininei de la 103 pelin de un an

4.4.2. Dezvoltarea unei tehnici de determinare cantitativă a artemisininei 104 prin HPLC-MS

4.4.3. Conținutul cantitativ al artemisininei în pelinul anual din diferite locuri de creștere

4.4.4. Analiza conținutului cantitativ al artemisininei în iarba 107 pelin anual pe diferite faze de dezvoltare și în diferite "părți ale plantei

CAPITOLUL 5. SETAREA INDICATORILOR 111 BUNEȚIREA MATERIALELOR PRIME

5.1. Indicatori morfometrici ai materiilor prime

5.2. Standardizare de lemn de pelin din lemn de pelin

5.2.1. Merchandising indicatori iarba Pietriș pelin!

5.2.2. Standardizarea plantei de pelin Siver în funcție de conținutul de 115 hamazulelen în compoziția uleiului esențial

5.2.3. Stabilirea duratei de valabilitate a gazonului pelvisului Sivers

5.3. Standardizarea anuală a pelinului de pelin

5.3.1. Indicatorii de marfă anual săgeți roșu * * ^

5.3.2. Standardizarea plantei pelinice anuale privind conținutul de artemisinin

5.3.3. Stabilirea duratei de valabilitate a plantei pelinice anuale

Introducerea lucrării pe tema "Chimie farmaceutică, farmacognostică", Soktoeva, Tuyana Erdemovna, abstract

Relevanța subiectului. Plante Artemisia genul (Artemisia) -perspektivnye surse de substanțe biologic active, specii precum tarhon Artemisia dracunculus L., pelinul Artemisia absinthium L., Artemisia vulgaris Artemisia vulgaris L. utilizate pe scară largă în medicină și alimentare industriile tradiționale, holistică. Peliniță Peliniță L. a fost introdus cu succes în cultura în multe țări, iar în 2001 a fost propus de OMS ca sursă principală de artemisinin - prima linie de agent de tratament pentru malarie. Astăzi, țările producătoare de artemisinin asigură aproximativ un sfert din nevoile globale de sănătate [1, 2]. Au fost izolați compuși biologic activi de la vârsta de un an, incluzând 40 de sesquiterpene, 10 triterpene, 7 cumarine și 46 de flavonoide, care pot servi drept bază pentru dezvoltarea medicamentului [3]. În anii '80 ai secolului XX, un grup de oameni de știință [4] a încercat să cultive secția de creștere sălbatică a florei de un an a URSS în ULI (Moscova). În zilele noastre, lucrările majore privind introducerea elementului de primă ani se desfășoară la Universitatea de Stat Tomsk. În Buryatia n. Anul este o specie de creștere sălbatică.

Împreună cu vechea de un an din Buryatia, pelinul Sivers Artemisia sieversiana Willd este răspândit, care este și o specie promițătoare. În iarba lui P. Sievers conține flavonoide, ulei esențial, cumarine [5-8]. Uleiul esențial din Seabera prezintă interes ca sursă de Chamazulene, un compus netoxic cu efecte regenerative antiinflamatorii, bactericide [9, 10].

Obiectiv: Studiul farmacognostic al pelinului Sivers Artemisia sieversiana Willd. și pelinul anual Artemisia annua L. ca surse valoroase de substanțe biologic active.

Pentru a atinge acest obiectiv este necesar să se rezolve următoarele sarcini:

1. Identificarea trăsăturilor anatomice și diagnostice ale părții de sus a terenului Sivers p. Și p. Un an, stabilirea indicatorilor de materii prime pentru materii prime, evaluarea rezervelor și posibilitatea recoltării p. De un an și Sivers pe teritoriul Republicii Buryatia;

3. Să dezvolte o metodă pentru determinarea cantitativă a artemisininei în partea aeriană a vârstei de un an;

Indicatorii de calitate stabiliți de BAS sunt incluși în documentele de reglementare.

Semnificația practică. Rezervele și volumul anual posibil de achiziționare a unei localități Sivers și o decontare de un an pe teritoriul Republicii Buryatia (decontarea Sivers - de la 0,1 la 73,7 tone pe an și o decontare de un an - de la 1,2 la 122,3 tone pe an).

Standardizarea materiilor prime a fost realizată, au fost elaborate proiectele FS - "Sivers Wormwood Herbal" și "Pelicula de un an de pelin".

Lucrarea a fost realizată ca parte a proiectelor de cercetare: RFBR: No. 08-04-90202-Monga "Studiul modelelor biogenetice de biosinteză a compușilor biologic activi ai plantelor endemice din Asia Centrală" (2008-2009), nr. 08-04-9803 7-rsibirya și

Compoziția chimică a plantelor ca indicator al stării ecosistemelor regiunii Baikal "(2008-2010); proiect de integrare interdisciplinară №93 "Dezvoltarea cercetării în domeniul chimiei medicale și farmacologiei ca bază științifică pentru dezvoltarea drogurilor domestice"; un proiect comun cu Academia de Științe din Mongolia "Obținerea de noi forme lipo-și nanozomale de droguri care utilizează materii prime naturale"; RFBR: № 10-03-16001-mobzros "Mobilitatea tinerilor oameni de știință" (2010), №11-03-90705-munca științifică (formare) a tinerilor oameni de știință ruși în organizațiile științifice din Federația Rusă 2011 (2011).

La apărare sunt scoase:

• rezultatele studiului structurii anatomice, stocurilor, criteriilor de autenticitate ale Sivers și P., crescând în Buryatia;

• rezultatele unui studiu chimic al substanțelor biologic active și dinamica lor de acumulare sezonieră;

• rezultatele studiilor asupra standardizării părții de sus a solului Sivers p. Și p. Un an.